超微量分光光度計 -測量原理 分光光度法則是通過測定被測物質(zhì)在特定波長處或一定波長范圍內(nèi)光的吸收度,對該物質(zhì)進行定性和定量分析。常用的波長范圍和對應的儀器分別為:
1.200~400nm的紫外光區(qū)紫外分光光度計
2.400~760nm的可見光區(qū)可見光分光光度計
3.2.5~25μm(按波數(shù)計為100000px<-1>~10000px<-1>)的紅外光區(qū)。紅外分光光度計或原子吸收分光光度計。
單色光輻射穿過被測物質(zhì)溶液時,被該物質(zhì)吸收的量與該物質(zhì)的濃度和液層的厚度(光路長度)成正比,其關系如下式:
A=-log(I/IO)=-lgT=kLc
物質(zhì)對光的選擇性吸收波長,以及相應的吸收系數(shù)是該物質(zhì)的物理常數(shù)。當已知某純物質(zhì)在一定條件下的吸收系數(shù)后,可用同樣條件將該供試品配成溶液,測定其吸收度,即可由上式計算出供試品中該物質(zhì)的含量。在可見光區(qū),除某些物質(zhì)對光有吸收外,很多物質(zhì)本身并沒有吸收,但可在一定條件下加入顯色試劑或經(jīng)過處理使其顯色后再測定,故又稱比色分析。由于顯色時影響呈色深淺的因素較多,且常使用單色光純度較差的儀器,故測定時應用標準品或對照品同時操作。
超微量分光光度計
1. 所需樣品體積小,僅需1~2μL
2. 不需要比色皿,用移液槍直接將樣品滴加到檢測平臺上,測量時樣品自動形成液柱,檢測完成后只需用干凈的吸水紙將樣品從檢測平臺上擦拭干凈即可;
3. 具有1mm和0.2mm兩個光程(電機控制自動選擇),樣品無需稀釋,測量范圍可達到常規(guī)分光光度計的50倍.
4. 氙氣閃光燈為燈源,壽命長,性能穩(wěn)定
5. 不需要預熱,可隨時檢測
6. 顯示吸光度值的同時,程序直接給出濃度值(核酸、蛋白和熒光染料)
7. 體積?。合喈斢谝槐咀值浯笮?,僅占16.5厘米實驗室空間。
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