使用二氧化碳培養(yǎng)箱時(shí)偶爾會(huì)伴有霉菌的生長,那么我們應(yīng)如何進(jìn)行滅菌呢?
如帶有紫外消毒功能的CO2培養(yǎng)箱(如三洋品牌的MCO二氧化碳培養(yǎng)箱);還有的設(shè)計(jì)生產(chǎn)了HEPA過濾器能過濾培養(yǎng)箱內(nèi)空氣,可過濾除去99.97%的0.3微米以上的顆粒,此外,還開發(fā)設(shè)計(jì)了能使箱內(nèi)達(dá)到高溫濕熱的環(huán)境從而殺死污染微生物,達(dá)到消毒滅菌目的的培養(yǎng)箱。
這些裝置對于細(xì)胞培養(yǎng)來說是*,但選擇何種清潔裝置呢?首先,我們考慮的當(dāng)然是各種方式的滅菌能力,紫外消毒能力是與紫外燈距離目標(biāo)的距離的二次方成反比,距離越遠(yuǎn),消毒能力越差,所以紫外消毒方式有其局限性,難以達(dá)到*滅菌的要求;HEPA過濾器由于受到過濾膜孔徑的影響,無法去除病毒和一些微小細(xì)菌,也有其局限性;相比較而言,高溫消毒是目前比較有效消毒滅菌的方法,高溫消毒又分為兩類,一是傳統(tǒng)的高溫干熱消毒,另一種是*高溫濕熱滅菌。接下來我們重點(diǎn)說一下高溫干熱和高溫濕熱兩種方法的優(yōu)劣。高溫濕熱由于蒸汽潛熱大,穿透力強(qiáng),容易使蛋白質(zhì)變性或凝固,因此該法的滅菌效率比干熱滅菌法高。
二氧化碳培養(yǎng)箱
其原因有三:①蛋白質(zhì)凝固所需的溫度與其含水量有關(guān),含水量愈大,發(fā)生凝固所需的溫度愈低。濕熱滅菌的菌體蛋白質(zhì)吸收水分,所以較同一溫度的干熱空氣中易于凝固。②濕熱滅菌過程中蒸汽放出大量潛熱,加速提高濕度。因而濕熱滅菌比干熱所需溫度低,如在同一溫度下,則濕熱滅菌所需時(shí)間比干熱短。③濕熱的穿透力比干熱大,使其深部也能達(dá)到滅菌溫度,故濕熱比干熱收效好一些。所以高溫消毒并不是簡單的看消毒溫度,主要是看是否濕熱消毒。
另外,從使用角度看,濕熱消毒一般控制在90°C就能達(dá)到很*的消毒效果,整個(gè)消毒過程中培養(yǎng)箱內(nèi)的所有附件都不用取出,可以全部進(jìn)行消毒;而干熱消毒為了達(dá)到較好的效果,溫度一般都在100°C以上,在這種溫度下消毒培養(yǎng)箱內(nèi)的傳感器、HEPA過濾器等都要在消毒過程中取出,等消毒結(jié)束再裝上,這樣即麻煩,附件又不能同時(shí)消毒,而且增加二次污染的幾率,再者要達(dá)到100°C以上的高溫,培養(yǎng)箱的加熱系統(tǒng)的電熱絲必然要加粗,這會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)箱的溫度控制難度增加,均一性變差。所以我們建議用戶在選購二氧化碳培養(yǎng)箱時(shí)選擇含高溫濕熱滅菌方式的培養(yǎng)箱。
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